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免疫磁珠

伴刀豆球蛋白 A(ConA)磁珠

货号

产品概述

本产品采用新一代纳米表面生物技术,将伴刀豆球蛋白A高密度共价偶联在超顺磁性纳米微球表面,可用于从血清和细胞提取物中分离糖蛋白。与当前国际市场上同类产品相比,其具有更大的特异性表面区域及更多的表面蛋白结合位点,非特异性结合低,使用起来简便高效。

产品参数

YJ012-1.png

自备试剂

YJ012-2.png

操作步骤

  •    ◆

    样本处理
        1. 准备哺乳动物细胞(1.0×104~1.0×105个),离心收集(4℃,600×g,3~5min),小心吸弃上清
        2. 加入90μL结合缓冲液 ,充分混匀重悬细胞,离心收集(4℃,600×g,3~5min),小心吸弃上清;
        3. 加入90μL洗脱缓冲液 ,同时加入蛋白酶抑制剂(货号:GRF101),充分混匀重悬细胞;

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    磁珠预处理
        4. 用移液器轻柔吹打伴刀豆球蛋白A磁珠,使其充分混悬,取10μL磁珠悬液置于新的1.5mL离心管中,接着在磁力架上静置1min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,吸弃上清
        5. 加入200μL结合缓冲液 ,用移液器轻柔吹打重悬磁珠,接着在磁力架上静置1min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,吸弃上清;
        6. 重复步骤 5 一次;
        注意:面对多个样品时,可先将总共所需的磁珠预处理后再分装到各个反应管中。

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    样品的结合
        7. 在预处理后的磁珠中加入步骤3处理后的细胞样本,置于翻转混合仪上孵育(常温30min),接着在磁力架上静置1min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,小心吸弃上清,离心管中剩余的即为蛋白-磁珠复合物;

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    洗涤
        8. 在步骤7得到的蛋白-磁珠复合物中加入500μL漂洗缓冲液,用移液器轻柔吹打磁珠,使其充分混悬,接着在磁力架上静置1min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,吸弃上清。再重复此步骤两次。

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    蛋白洗脱
        9. 在步骤8得到的蛋白-磁珠复合物中加入50~250μL洗脱缓冲液,置于翻转混合仪上孵育(常温10~30min),接着在磁力架上静置1min,待磁珠吸附到离心管侧壁上后,收集上清,即为目的蛋白。

注意事项

1. 避免使用含有EDTA或其它金属螯合剂的试剂,否则会降低磁珠与蛋白的结合效率;

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

3. 本产品仅限科研使用。

产品中心 / 蛋白表达纯化与分离 / 免疫磁珠

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